Un modelo de cocultivo tridimensional de células T infiltrantes en esferoides tumorales

Comience con una placa de cultivo que contenga un molde de agarosa. El molde comprende una cámara de siembra con múltiples micropocillos.

Cada micropocillo contiene un esferoide tumoral en un medio de cultivo. Los esferoides son agregados tridimensionales de células tumorales.

Primero, retire el medio que rodea el molde de agarosa. Luego, retire el medio dentro del molde de una esquina de la cámara de siembra para evitar la pérdida de esferoides.

Introduzca una suspensión de células T específicas del tumor gota a gota en la cámara de siembra, permitiendo que las células se asienten en los micropocillos que contienen los esferoides.

A continuación, agregue un medio de cultivo alrededor del molde de agarosa e incube la placa en condiciones fisiológicas para desarrollar un cocultivo.

Durante la incubación, las células T rodean el esferoide. Un subconjunto de células T se infiltra en el esferoide, mientras que otras permanecen en la periferia, estableciendo un modelo de cocultivo tridimensional.

Para establecer un cocultivo de células T, vuelva a suspender el número apropiado de células T en 190 microlitros de un medio de cultivo de células T apropiado por pocillo e incline la placa de