Ensayo in vitro para evaluar la actividad antitumoral de las células CAR-T específicas de tumores
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 2:42 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de múltiples pocillos que contiene células tumorales de linfoma de células B que expresan un antígeno de superficie específico de células B y una enzima luciferasa citoplasmática.
Introduzca las células T con CAR en pocillos seleccionados e incube. Las células expresan receptores de antígenos quiméricos, o CAR, que comprenden un dominio extracelular dirigido al antígeno tumoral y a los dominios de señalización intracelular.
El CAR se une al antígeno tumoral, induciendo la activación de las células T con CAR.
Las células activadas liberan citoquinas que promueven la actividad antitumoral de las células, desencadenando la liberación de toxinas.
Las toxinas ingresan a las células tumorales e inducen la muerte celular.
Gire las células y aísle el sobrenadante. Cuantificar las citocinas para evaluar la actividad de las células T con CAR.
Vuelva a suspender las células en un tampón que contenga luciferina, un sustrato bioluminiscente.
Al ingresar, la luciferina es oxidada por la luciferasa en las células tumorales vivas, emitiendo luz.
Medir la bioluminiscencia para identificar una disminución de la señal en las células tumorales tratadas, confirmando la citotoxicidad medi
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos