Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 1:49 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de pocillos múltiples que contenga esferoides de cáncer colorrectal en un medio de cultivo.
Los esferoides son agregados tridimensionales de células cancerosas que se asemejan al microambiente fisiológico del tumor.
Retire el medio de cultivo y agregue concentraciones crecientes de sobrenadante libre de células de Lactobacillus, o LCFS, el sobrenadante de cultivo obtenido de un cultivo de Lactobacillus, una bacteria del tracto digestivo.
El LCFS carece de células bacterianas, pero contiene metabolitos activos con actividad anticancerígena secretada por las bacterias.
Los metabolitos bacterianos en el LCFS interactúan con las células cancerosas en el esferoide, induciendo la apoptosis y provocando la muerte celular.
El daño a las células da como resultado la alteración de la morfología del esferoide.
Con un microscopio, examine los esferoides tratados con LCFS para observar un aumento en la muerte celular con el aumento de la concentración de LCFS, lo que indica la actividad anticancerígena dependiente de la dosis de los metabolitos bacterianos.
Para el tratamiento con LCFS, diluya en serie la solución madre de LCFS descongelada preparada en un medio de crecimiento fresco a concentraciones del 25%, 12,5 y 6% y use una pipeta de 200 microlitros para eliminar cuidadosamente la mayor cantidad posible de sobrenadante de cada pocillo de los cultivos de líneas celulares de cáncer colorrectal en placas.
Luego, agregue suavemente 200 microlitros del medio de crecimiento suplementado con LCFS por triplicado a cada conjunto de células cancerosas y regrese la placa a la incubadora durante 24 a 48 horas adicionales.