Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Inmunología
0 visualizaciones • 3:32 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de micropocillos recubierta con fragmentos de fibronectina recombinante y agregue células T murino CD8 positivas activadas.
Introducir vectores retrovirales que contengan un ARN transgénico que codifique un receptor de antígeno quimérico o CAR.
Cubra el plato y séllelo en una bolsa para evitar la contaminación. Centrifugar la placa a baja velocidad para facilitar la interacción virus-célula.
La fibronectina se une al virus y a la célula, colocalizándolos para mejorar la transferencia de genes mediada por virus.
Después de la centrifugación, retire la bolsa sellada e incube la placa en condiciones fisiológicas.
La envoltura del vector viral se fusiona con la membrana celular, liberando el ARN viral y las enzimas.
Las enzimas virales transcriben inversamente el ARN liberado e integran el ADN resultante en el genoma del huésped, lo que permite a las células expresar CAR unidos a la superficie.
El CAR comprende un dominio de unión al antígeno específico del antígeno diana y dominios de señalización para la activación de las células T.
Las células T con CAR específicas de antígeno están listas para ensayos posteriores.
El día 1, prepare placas recubiertas de fragmentos de
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