Una técnica de conjugación avidina-biotina para presentar antígenos diana en Mycobacterium bovis BCG

Comience con una suspensión de Mycobacterium bovis BCG, tratada con un tensioactivo no iónico, para evitar la aglomeración bacteriana.

A continuación, agregue un reactivo de biotinilación e incube.

Este reactivo de biotinilación, un complejo de biotina complejado a un enlazador funcional, facilita la unión de moléculas de biotina a las proteínas de la superficie bacteriana, marcando bacterias.

Después de la incubación, centrifugar la suspensión bacteriana marcada con biotina para eliminar el reactivo de biotinilación sin reaccionar.

Vuelva a suspender las bacterias en un tampón. Agregue una solución de proteína de fusión de avidina, una proteína recombinante que comprende un dominio de antígeno diana fusionado con avidina monomérica.

Durante la incubación, la avidina se une a la biotina, facilitando la modificación de la superficie bacteriana con antígenos diana.

Centrifugar la suspensión para eliminar las proteínas de fusión no unidas.

Vuelva a suspender las bacterias recubiertas de antígeno en un tampón que contenga un tensioactivo no iónico. El recubrimiento de antígeno de las bacterias puede mejorar su propiedad para desencadenar respuestas inmunes.

Trabaje en un gabinete de bi