Un método para el tratamiento con alto contenido de sal de células dendríticas y su transferencia adoptiva a ratones

Comience con una placa de pocillos múltiples que contenga una suspensión de células dendríticas o DC.

Para imitar una condición hipertensiva, agregue un medio de cultivo que contenga una alta concentración de iones de sodio e incube.

Durante la incubación, los iones de sodio ingresan a la célula, aumentando la concentración de sodio intracelular.

Esto desencadena el intercambio de iones de sodio intracelulares con iones de calcio extracelulares.

El aumento de los niveles internos de calcio activa vías que facilitan la generación de aldehídos reactivos, que se unen a las proteínas celulares. Esto activa las DC, que muestran estas proteínas modificadas en su superficie.

Después de la incubación, recoger las células en un tubo y centrifugar.

Retire el sobrenadante. Agregue un tampón nuevo para volver a suspender las celdas.

Dibuje la suspensión celular en una jeringa.

Tome un ratón anestesiado e inyecte la suspensión celular retroorbitalmente, que es un área detrás de la cuenca del ojo.

Este proceso de inyección de células inmunitarias activadas se denomina transferencia celular adoptiva.

Pipetee 900 microlitros de la suspensión de CC en una placa de halcón de fondo plano de 24 pocill