Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:51 min. • July 8th, 2025
Tomemos un cerebro de cachorro de ratón transgénico.
Extirpe el cerebelo y diseccione el cerebro. Separar el tejido cortico-hipocampal que contiene neuronas excitadoras que expresan proteínas fluorescentes.
Transfiera el tejido a una placa de cultivo que contenga tampón.
Pica el tejido y transfiérelo a un tubo que contenga papaína.
La papaína digiere la matriz extracelular del tejido, aflojando las células, incluidas las neuronas.
Transfiera el tejido digerido a un tubo con proteínas BSA, deteniendo la actividad enzimática y previniendo el daño celular.
Disociar mecánicamente los tejidos, liberando células.
Centrifugar y eliminar el sobrenadante que contiene desechos y enzimas.
Vuelva a suspender las células en medios neuronales de baja fluorescencia y filtre a través de un filtro celular, eliminando los agregados celulares.
Realice la clasificación de células activadas por fluorescencia para identificar y clasificar las neuronas fluorescentes.
Transfiera las neuronas clasificadas a un tubo de microcentrífuga y centrífuga. Resuspender neuronas en medios neuronales.
Sembrar neuronas en cubreobjetos recubiertos de poli-L-lisina en una placa de pocillos múltiples. Las neuronas se adhi
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos