Un método in vitro para generar organoides cerebrales humanos

Comience con un cultivo de neuroesferas, grupos flotantes de células progenitoras neuroepiteliales.

Transfiera estas neuroesferas a una hoja de inclusión.

Retire los medios. Agregue una gota de matriz de membrana extracelular que contenga proteínas y factores de crecimiento a cada neurosfera.

Incubar para que la matriz se solidifique, incrustando las neuroesferas dentro de ella.

Ahora, transfiera las neuroesferas incrustadas en la matriz utilizando medios de neuroesferas a una placa de cultivo que contenga medios de neuroesferas.

incubar. La matriz de la membrana extracelular y sus constituyentes facilitan la diferenciación de las células progenitoras neuroepiteliales en células neuroepiteliales que proliferan y forman lúmenes llenos de líquido.

Después de la incubación, transfiera las neuroesferas a un matraz giratorio que contiene medios organoides cerebrales precalentados. Incubar con agitación para mejorar la difusión de oxígeno y nutrientes, promoviendo el crecimiento celular.

Los factores de crecimiento y los inhibidores de moléculas pequeñas en los medios promueven la diferenciación neuronal y se convierten en células de regiones específicas del cerebro, formando organoides