Generación de organoides cerebrales derivados de células madre pluripotentes inducidas

Tomemos colonias de células madre pluripotentes inducidas, o iPSC, cultivadas en una matriz de soporte.

Agregue una solución que contenga enzimas para disociar las colonias en células individuales.

Transfiera las células a un tubo, centrítelas y deseche el sobrenadante.

Vuelva a suspender las iPSC en un medio de crecimiento.

Transfiera las células a una microplaca que contenga fibras poliméricas biocompatibles.

Centrífuga para forzar la adición de iPSC, formando cuerpos embrioides, o EB, en el andamio polimérico.

Transición a un medio de inducción neural que promueve la proliferación y diferenciación de iPSC en células madre neurales, células progenitoras y neuronas inmaduras.

Tras la incubación, las células se autoorganizan.

Coloque los cuerpos embrioides en una hoja con hoyuelos y agregue gotas que contengan proteínas de la matriz extracelular.

Incubar para solidificar la matriz, incrustando los EB.

Transfiera los EB a una microplaca que contenga un medio de mantenimiento neuronal. Incubar.

Los EB experimentan proliferación celular para formar protuberancias y gemaciones y diferenciarse en neuronas maduras, formando organoides cerebrales.

Aspire el medio con una pipeta y lave las