Una técnica sencilla para aislar y cultivar astrocitos murinos

0 visualizaciones • 4:51 min. • July 8th, 2025

Corte la corteza de un ratón en trozos pequeños y transfiérala a un medio de disección fría que contenga una solución salina tamponada.

Agregue enzimas digestivas para disociar la matriz extracelular.

Para eliminar las enzimas residuales, lavar con el medio de disección en frío.

Reemplace este medio con un medio de enriquecimiento de astrocitos.

A continuación, use una pipeta para disociar las piezas de tejido.

Pasar la suspensión a través de un colador para eliminar el tejido no disociado y obtener células individuales.

Transfiera las células a una placa recubierta de polímero cargada positivamente. Incubar agitando.

Los astrocitos se adhieren firmemente, mientras que las neuronas, la microglía y los oligodendrocitos se desprenden

.

El medio de enriquecimiento convierte los astrocitos maduros en astrocitos poligonales divisorios.

Retire las células desprendidas y lave los astrocitos con un tampón de fosfato.

Agregue enzimas digestivas para separar los astrocitos.

Agregue un medio que contenga suero para detener la actividad enzimática. Recoge los astrocitos en un tubo y centrífuga.

Deseche el sobrenadante. Resuspender las células en un medio de maduración de astrocitos para promove

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