Generación de células neuronales a partir de células madre pluripotentes derivadas de la sangre

Tome una microplaca con cubreobjetos de vidrio colocados en el fondo de los pocillos.

Introduzca un polímero cargado positivamente para cubrir los cubreobjetos y lávelos para eliminar cualquier polímero no unido. Tratar con una proteína de matriz extracelular para recubrir los cubreobjetos y aspirar las proteínas no unidas.

El recubrimiento actúa como sustrato de cultivo que facilita la adhesión celular.

Agregue un medio de inducción a los pocillos e introduzca una suspensión de células madre pluripotentes derivadas de la sangre, o BD-PSC. Estas células, capaces de diferenciarse en varios tipos de células, se generan mediante la reprogramación de células progenitoras sanguíneas.

Incubar para que las células se adhieran al sustrato. Los factores de crecimiento y los nutrientes en el medio de inducción transforman las BD-PSC en células progenitoras neurales.

Introducir un medio de diferenciación que contenga factores de crecimiento neuronal e incubar, desencadenando la diferenciación de los progenitores neurales en un fenotipo neuronal, exhibiendo procesos celulares extendidos y contactos célula-célula.

Coloque los cubreobjetos de vidrio en placas de 4 pocillos y cúbralos con 1 a 5 p