Aislamiento y cultivo de células madre neurales adultas de la zona subcallosa del ratón
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:31 min. • July 8th, 2025
Comience con un cerebro de ratón en una matriz cerebral fría.
Obtenga secciones que contengan la zona subcallosa o SCZ. Transfiera la sección a un tampón de fosfato frío.
Bajo un microscopio de disección, corte la parte SCZ.
Pica el SCZ diseccionado en trozos más pequeños.
Transfiera estas piezas a un tampón de digestión. Incubar para disociar las células del tejido.
Centrifugar y desechar el sobrenadante. Vuelva a suspender las células en un medio adecuado.
Transfiera las células a una placa de cultivo y agregue factores de crecimiento específicos.
Las células madre neurales adultas se dividen, formando grupos llamados neuroesferas.
La distribución inadecuada de nutrientes en los grupos celulares limita el crecimiento celular.
Para dispersar los racimos, centrifugar y desechar el sobrenadante. Vuelva a suspender los grupos en un tampón de disociación e incube.
Pipetee la solución hacia arriba y hacia abajo para generar células individuales.
Centrifugar y desechar el sobrenadante.
Vuelva a suspender las células y transfiéralas a un medio adecuado para obtener una monocapa.
Una vez diseccionado, transfiera el cerebro del ratón a un tampón PBS frío y enjuáguelo dos veces para elimina
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