Establecimiento de un cocultivo de células de pulpa dental y neuronas del trigémino para la comunicación cruzada

Comience con una suspensión rica en células madre mesenquimales obtenida del tejido pulpar dental del ratón.

Incubar para permitir la adhesión y proliferación celular, formando una monocapa.

Coloque un inserto de membrana porosa recubierto con laminina en el pocillo que contiene las células de la pulpa dental.

Siembre el inserto con un medio de cocultivo que contenga neuronas del trigémino derivadas del cerebro del ratón. Incubar para permitir la unión de neuronas.

Reemplace el medio con un medio de cocultivo que contenga reguladores del crecimiento como uridina y 5-fluoro-2 desoxiuridina.

Estas moléculas ingresan a las células y controlan el crecimiento de las células madre mesenquimales que proliferan activamente al inhibir la síntesis de ADN.

Con el tiempo, las células mesenquimales secretan pequeñas moléculas de señalización que atraviesan la membrana porosa para estimular las neuronas del trigémino.

Esta estimulación hace que los procesos neuronales de las neuronas del trigémino se alarguen hacia las células mesenquimales. Además, las neuronas secretan moléculas de señalización, lo que permite la comunicación cruzada.

Después de la eutanasia del ratón, coloque la cabeza sobre