Establecimiento de un tumor cerebral en un modelo de cocultivo de cortes organotípicos

Comience con un corte de cerebro de ratón incrustado en agarosa.

Coloque el corte de cerebro en un inserto de membrana que contenga un medio de cultivo.

Sumerja la rebanada para asegurar una exposición uniforme a los nutrientes.

Recoja un pequeño volumen del medio del inserto y transfiéralo al fondo del pozo.

Retire el exceso de medio del inserto.

Transfiera el inserto a una placa de Petri que contenga el medio de cultivo.

Retire con cuidado los bordes de agarosa de la rebanada para que sea accesible para interacciones posteriores.

Coloque el inserto en un nuevo pocillo que contenga el medio de cultivo e incube para facilitar la recuperación de la rebanada.

Agregue células tumorales cerebrales humanas a la rebanada e incube.

Las células tumorales interactúan con las células cerebrales y el microambiente dentro de la rebanada, iniciando la multiplicación y estableciendo un modelo de cocultivo 3D.

Con una espumadera, coloque una rebanada de cerebro en el medio del inserto y presione suavemente la rebanada para que quede completamente sumergida. Repita el procedimiento para todas las rebanadas. A continuación, extraiga un mililitro de medios de cultivo en rodajas de la parte superior