Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:38 min. • July 8th, 2025
Comience con un cultivo adherente de colonias de células progenitoras neurales inducidas derivadas de fibroblastos humanos adultos en una placa de pocillos múltiples recubierta de laminina.
Lave las colonias con un tampón para eliminar las células no adherentes, luego agregue un tampón nuevo.
Raspe alrededor de las colonias individuales para eliminar las células circundantes.
Transfiera las colonias a pocillos frescos recubiertos de laminina que contengan medio de neuroinducción.
Desagregar mecánicamente las colonias para obtener una suspensión unicelular.
La laminina, una proteína de la matriz extracelular, interactúa con las proteínas de superficie de los progenitores, facilitando la adhesión celular a la superficie del pozo.
Agregue un inhibidor de molécula pequeña que ingrese a las células y bloquee proteínas quinasas específicas, previniendo la apoptosis celular.
Los factores de crecimiento y las moléculas pequeñas presentes en el medio de neuroinducción facilitan la proliferación de los progenitores.
Reemplace periódicamente el medio para reponer los nutrientes, lo que facilita la proliferación continua de progenitores.
Un cultivo confluente, o una capa celular completamente
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