Generación de un cultivo neuronal de ultra baja densidad utilizando una capa alimentadora de neuronas de alta densidad
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:03 min. • July 8th, 2025
Comience con dos placas de pocillos múltiples: una con un fondo grabado recubierto con un polímero y la otra con un cubreobjetos recubierto de polímero.
Siembre una suspensión de alta densidad de las neuronas embrionarias en la placa con el fondo grabado. Agregue una suspensión de neuronas de densidad ultrabaja al pozo de contención de cubreobjetos.
Incubar para permitir la unión neuronal a los polímeros.
Retire el cubreobjetos y colóquelo sobre el cultivo de neuronas de alta densidad, permitiendo que las neuronas se enfrenten entre sí.
La superficie grabada con estructuras elevadas crea un microespacio que separa neuronas de diferentes densidades.
El cultivo de alta densidad actúa como una capa alimentadora y secreta el factor de crecimiento neuronal.
Debido al espacio de difusión confinado, los factores de crecimiento se acumulan alrededor de las neuronas, facilitando su crecimiento y el desarrollo de proyecciones neuronales.
Introducir un medio neurobasal con arabinósido de citosina que inhibe selectivamente el crecimiento de las células no neuronales.
Reponer regularmente con un medio neurobasal fresco para mantener el cultivo neuronal.
En este procedimiento, coloque placas de
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