Diferenciación de células progenitoras neurales inducidas en astrocitos

Tome un cultivo de células progenitoras neurales inducidas, o iNPC, en una placa multipocillo recubierta de proteínas de matriz extracelular.

Reemplace el medio con medios de inducción glial e incube. Los factores de crecimiento y las hormonas en el medio facilitan la diferenciación de iNPC en células precursoras gliales.

Cambiar los medios cada dos días para la proliferación celular. Luego, reemplace el medio con medios de astrocitos e incube.

Los nutrientes específicos y los factores de crecimiento en el medio impulsan la diferenciación de las células precursoras gliales en astrocitos.

Los cambios en los medios cada dos días promueven la maduración de los astrocitos.

Cambie el medio a neuro-diff-medium cuando las células sean aproximadamente 70% confluentes y continúe cambiando el medio cada dos días durante tres semanas. No divida las células durante la diferenciación. Después de tres semanas, las células deberían expresar el marcador neuronal TuJ1.

Para obtener neuronas y subtipos neuronales más maduros, continúe la diferenciación hasta tres meses. Para la diferenciación de iNPC específicamente hacia un linaje glial, cambie el medio a medio de inducción glial, incluidos 20 nano