Diferenciación de una línea celular de neuroblastoma humano en neuronas maduras
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:08 min. • July 8th, 2025
Comience con una línea celular de neuroblastoma indiferenciada que comprenda células similares a neuronas y epiteliales en un medio de alta concentración de suero.
Retirar el medio y añadir un medio de diferenciación que contenga una concentración sérica reducida, suplementado con ácido retinoico.
La privación sérica previene la proliferación de células de tipo epitelial.
El ácido retinoico induce la expresión génica neuronal en las células similares a las neuronas, transformándolas en un fenotipo más diferenciado.
Agregue un cóctel de tripsina-EDTA para separar las células parcialmente diferenciadas.
Agregue medios que contengan proteínas séricas para bloquear la tripsina.
Coloque las células en placas e introduzca un nuevo medio de diferenciación que contenga ácido retinoico y un nivel sérico aún más reducido.
Las células continúan desarrollando procesos extendidos.
Agregue tripsina para separar las células.
A continuación, agregue medios para bloquear la tripsina y coloque las células en una placa recubierta de proteína de matriz extracelular para promover la adhesión celular.
Finalmente, suplementar con medio sin suero que contenga factores de crecimiento neuronal.
Estos factor
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