Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:22 min. • July 8th, 2025
Tome células madre embrionarias de ratón, o mESC, suspendidas en un medio de diferenciación, e incube.
En el cultivo en suspensión, las mESC se agregan para formar una estructura denominada cuerpos embrioides o EB.
Los EB son agregados tridimensionales que imitan a un embrión en desarrollo y se pueden diferenciar en células neuronales.
Transfiera los EB a un tubo y déjelos asentarse por gravedad.
Retire el medio agotado en nutrientes; vuelva a suspender los EB en un medio nuevo y transfiéralos a una placa de cultivo.
Incubar el cultivo en suspensión para facilitar el crecimiento de EB.
Transfiera los EB suspendidos en el medio a una placa multipocillos. Los pocillos están recubiertos con una proteína de adhesión, lo que permite que los EB se unan.
Introducir ácido retinoico, que entra en las células y desencadena la formación de un complejo de transcripción.
El complejo induce la expresión génica, promoviendo la diferenciación de las células en células progenitoras neurales, o NPC, que exhiben procesos celulares extendidos.
Agregue 1,5 millones de células madre embrionarias de ratón en una placa bacteriana no adhesiva en 10 mililitros de medio de diferenciación basal e incube la pl
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