Aislamiento de células de los ganglios sensoriales

Tome los ganglios sensoriales prelavados en un tubo.

Agregue una solución de disociación que contenga una mezcla de enzimas digestivas e incube.

Estas enzimas descomponen la matriz extracelular, liberando células individuales.

Después de la incubación, retire la solución de disociación.

Lave los ganglios con un tampón de fosfato y agregue una solución de disociación fresca.

Pipetea los ganglios hacia arriba y hacia abajo para disociar las células.

Pase la suspensión a través de un colador celular para eliminar los grumos.

Recoja las células restantes del fondo del colador y colóquelas en el tubo.

Coloque la suspensión celular sobre un tubo de gradiente de densidad y centrifuge.

Según las diferencias de forma y masa, las células migran a la capa inferior, mientras que los desechos celulares permanecen en la capa superior.

Deseche la capa superior.

Agregue medio fresco a la suspensión celular restante y centrifuge.

Deseche el sobrenadante y almacene las células de los ganglios sensoriales para su uso posterior.

Después de recolectar los ganglios sensoriales, aspire 500 microlitros de solución de disociación de ganglios de cada tubo sin alterar los ganglios. Luego, agregue 1 mililitro