Un método de tubo de rodillo modificado para el cultivo a largo plazo de rodajas de cerebro de roedores

Tomemos rodajas de cerebro obtenidas del cerebro de un roedor. Las rodajas consisten en el hipocampo, que contiene neuronas del hipocampo.

Transfiera las rodajas de cerebro a cubreobjetos que contengan plasma de pollo.

Aplique plasma mezclado con trombina a las rodajas. La trombina induce la coagulación del plasma, creando un andamio biológico que promueve la adhesión de las rodajas a los cubreobjetos.

Tome tubos de rodillos de lados planos con un orificio en el lado plano y un disco adhesivo unido alrededor del orificio en el exterior de los tubos.

Coloque los cubreobjetos en los discos adhesivos, asegurándose de que las rodajas de cerebro miren hacia el interior de los tubos.

Agregue un medio de cultivo neuronal a los tubos y fluya en una mezcla de dióxido de carbono y aire.

Tape los tubos, insértelos en una rejilla de rodillos e incube con un movimiento giratorio.

La aireación proporcionada por la incubación rodante y los nutrientes del medio apoyan el cultivo a largo plazo de los cortes de cerebro.

Para comenzar, prepare la rejilla para tubos de rodillos y haga una plantilla para ayudar a perforar un agujero en los tubos de rodillos, como se describe en el protocolo de texto ad