Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:32 min. • July 8th, 2025
Introducir fibroblastos dérmicos humanos adultos o aHDF, suspendidos en un medio de fibroblastos, en una microplaca recubierta de proteínas de matriz extracelular. Incubar para permitir la adherencia celular.
Introducir un vector lentiviral transgénico. Tras la internalización en la célula huésped, el ARN viral se transcribe inversamente en ADN, que se integra en el genoma del huésped.
El ADN viral expresa factores de transcripción y ARN de horquilla corta, o ARNsh. Las nucleasas celulares procesan los ARNhc en pequeños ARN o ARNip de interferencia.
Los ARNip generados degradan los ARNm que codifican los represores transcripcionales, inhibiendo así su expresión y permitiendo la activación de genes de diferenciación neuronal.
Los factores de transcripción activan los genes, promoviendo la diferenciación neuronal de los aHDF.
Elimine el medio que contiene los vectores no internalizados.
Agregue un medio de conversión neuronal temprana que contenga factores de crecimiento y pequeñas moléculas que induzcan la diferenciación en células similares a las neuronas.
Reemplace el medio con un medio de conversión neuronal tardía que contenga factores neurotróficos para la maduración en neurona
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