Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:08 min. • July 8th, 2025
Comience con colonias de células madre pluripotentes inducidas por humanos cultivadas en una matriz de membrana basal adherente.
Agregue un medio de diferenciación cerebelosa que contenga una hormona específica, factor de crecimiento e inhibidores de moléculas pequeñas.
Levante las colonias con una pipeta de vidrio y transfiéralas a una placa de fijación ultrabaja.
La superficie de baja adhesión mantiene las células en suspensión, facilitando su agregación en cuerpos embrioides tridimensionales, o EB.
La hormona, el factor de crecimiento y los inhibidores se unen a sus respectivos sitios diana, promoviendo la diferenciación de las células madre en progenitores neuronales.
Transfiera los EB a los pocillos de la placa de cultivo recubiertos con un polímero sintético y una proteína de adhesión para facilitar la unión de EB.
Reemplace el medio con un medio de diferenciación sin inhibidores.
Las células comienzan a migrar hacia afuera de los EB, formando una monocapa 2D.
Retire el medio y agregue un medio de maduración cerebelosa.
Los factores de crecimiento en el medio inducen la maduración de los progenitores neuronales en distintos precursores neuronales cerebelosos.
El día cero, agr
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