Cultivo y mantenimiento de neuronas dopaminérgicas a partir de tejido cerebral embrionario de ratón

0 visualizaciones • 4:22 min. • July 8th, 2025

Tratar el tejido embrionario del mesencéfalo, rico en neuronas dopaminérgicas en desarrollo, con una solución de tripsina-EDTA para separarlas de la matriz tisular.

Agregue un medio de desactivación para inhibir la actividad enzimática y luego lave para eliminar las enzimas residuales.

Pipetea el tejido repetidamente. Las neuronas embrionarias poseen menos proyecciones, lo que reduce el estrés durante esta alteración y genera una suspensión unicelular.

Centrifugar y eliminar el sobrenadante, luego volver a suspender las neuronas en un medio completo. Transfiera estas neuronas a un cubreobjetos recubierto de polímero para la unión celular.

Coloque el cubreobjetos en una placa de pocillos múltiples con un medio completo, proporcionando nutrientes y factores de crecimiento esenciales para el crecimiento de las neuronas.

Los antibióticos en el medio previenen el crecimiento bacteriano, apoyando la viabilidad neuronal.

A medida que las neuronas crecen y maduran, desarrollan proyecciones celulares, como axones y dendritas, formando conexiones sinápticas.

Periódicamente, retire la mitad de los medios usados para eliminar los subproductos tóxicos.

Agregue un medio nuevo para el mantenimien

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Tratamiento con tripsina-EDTA