Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:34 min. • July 8th, 2025
Tomemos cerebella de cachorro de ratón.
Homogeneizarlos en fragmentos más pequeños.
Agregue una enzima proteolítica para digerir la matriz extracelular del tejido, aflojando los progenitores granulares cerebelosos, o CGNP, y los astrocitos.
Agregue medios de cultivo CGNP que contengan suero para detener la actividad enzimática. Centrifugar y desechar el sobrenadante rico en enzimas.
Vuelva a suspender los fragmentos de tejido en medios CGNP. Disociar mecánicamente el tejido para liberar las células.
Una vez que los desechos se asienten, transfiera el sobrenadante que contiene las células a un tubo nuevo.
Centrifugar y eliminar el sobrenadante con residuos.
Vuelva a suspender las células en medios CGNP y siembre en pocillos de placas de múltiples pocillos recubiertos con poli-D-lisina. Incubar.
Los astrocitos se asientan y se adhieren fuertemente al recubrimiento de poli-D-lisina, en comparación con los CGNP.
Agite la placa y recoja el sobrenadante que contiene CGNP. Centrifugar y eliminar el sobrenadante.
Vuelva a suspender los CGNP en medios CGNP y siembre en una placa de pocillos múltiples recubierta de poli-L-ornitina. Incubar.
Los CGNP se adhieren a la superficie recubierta y p
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos