Diferenciación de células madre neurales en neuronas mediante un dispositivo microfluídico compartimentado

Tomemos un dispositivo microfluídico que consta de pozos de reservorio conectados a dos compartimentos, uno somático y otro axonal, separados por una barrera de microranuras.

Los compartimentos y microsurcos están recubiertos con un sustrato de cultivo celular para facilitar la adhesión celular.

Agregue un medio de células madre neurales a cada pocillo e incube para preacondicionar el dispositivo para el cultivo celular.

Deseche el papel. Agregue células madre neurales, o NSC, a los pocillos del compartimento somático y permita que las células se adhieran.

Agregue el medio NSC a cada pocillo e incube en una cámara humidificada para evitar la evaporación del medio. Durante la incubación, las NSC proliferan.

Reemplace el medio NSC con un medio de diferenciación neuronal e incube.

Las pequeñas moléculas en el medio inducen la diferenciación de las NSC en neuronas dentro del compartimento somático, con sus axones extendiéndose a través de los microsurcos hacia el compartimento axonal.

Las neuronas diferenciadas con axones extendidos están listas para más ensayos.

Para comenzar, disuelva la poli-l-ornitina en agua destilada de grado de cultivo celular para hacer 600 microlitros de soluc