Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:24 min. • July 8th, 2025
Tomemos la retina de una rata, una capa sensible a la luz del ojo que contiene neuronas ganglionares de la retina o RGN.
Coloque la retina en una solución salina equilibrada en frío para evitar daños en los tejidos.
Transfiera la retina a una solución que contenga proteasa y ADNasa y córtela en trozos más pequeños.
Transfiera el contenido a un tubo e incube.
La proteasa descompone la matriz extracelular y afloja las células, mientras que la ADNasa degrada cualquier ADN contaminante.
Pipetea hacia arriba y hacia abajo para dispersar los grupos celulares.
Agregue una solución inhibidora para detener la acción de la proteasa.
Centrifugar las células para asentarlas. Retire el sobrenadante y vuelva a suspender las células en un medio de crecimiento adecuado.
Agregue esta suspensión celular a la monocapa de células gliales o OEG que envuelven olfativamente, un tipo de célula glial, e incube.
Los RGN se integran en la monocapa de OEG, estableciendo el modelo de cocultivo para evaluar el potencial neurorregenerativo de los OEG.
Colocar la retina en una placa de cultivo celular P-60 previamente preparada con 5 mililitros de EBSS frío. Luego, transfiéralo a una placa de cultivo celular P-60
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