Un método para generar medio condicionado por oligodendrocitos

0 views • 2:01 min • July 8th, 2025

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Tome una placa de Petri recubierta de polímero.

Agregue linaje de oligodendrocitos o células OL a un medio de cultivo adecuado e incube.

La carga positiva en el recubrimiento de polímero atrae la membrana celular cargada negativamente, mejorando la unión celular al plato. Los factores de crecimiento y los nutrientes del medio facilitan la expansión celular.

Reemplace el medio con un medio pobre en nutrientes e incube.

Los niveles bajos de nutrientes inducen un estrés leve en las células, lo que hace que secreten proteínas, lípidos y otras moléculas, incluidos factores de crecimiento y citocinas, en el espacio extracelular.

Recoge el medio en un tubo.

Esterilizar el medio con filtro para eliminar los restos celulares y los componentes insolubles.

El filtrado que contiene las moléculas bioactivas solubles secretadas por las células OL se denomina medio condicionado por oligodendrocitos u OCM.

Almacene el OCM a temperaturas más bajas hasta su uso posterior para evitar la degradación de proteínas y otras moléculas, preservando así la eficacia del OCM.

Coloque dos o tres placas de Petri de 100 milímetros prerrecubiertas con 10 mililitros de suspensión celular.

Incubar en una incubadora humidificada a 37 grados centígrados con un 5% de dióxido de carbono.

En una campana de flujo laminar en condiciones estériles, renueve el medio de cultivo con 10 mililitros de Mbb 27 bajo medio tibio.

Incubar durante 2 días en una incubadora humidificada a 37 grados centígrados bajo un 5% de dióxido de carbono.

Para cosechar el OCM, recolecte el sobrenadante que contiene factores secretados por oligodendrocitos. Esterilizar el OCM con un filtro de 0,22 micras.

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Last updated: 27 June 2026