Un método para generar medio condicionado por oligodendrocitos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:01 min. • July 8th, 2025
Tome una placa de Petri recubierta de polímero.
Agregue linaje de oligodendrocitos o células OL a un medio de cultivo adecuado e incube.
La carga positiva en el recubrimiento de polímero atrae la membrana celular cargada negativamente, mejorando la unión celular al plato. Los factores de crecimiento y los nutrientes del medio facilitan la expansión celular.
Reemplace el medio con un medio pobre en nutrientes e incube.
Los niveles bajos de nutrientes inducen un estrés leve en las células, lo que hace que secreten proteínas, lípidos y otras moléculas, incluidos factores de crecimiento y citocinas, en el espacio extracelular.
Recoge el medio en un tubo.
Esterilizar el medio con filtro para eliminar los restos celulares y los componentes insolubles.
El filtrado que contiene las moléculas bioactivas solubles secretadas por las células OL se denomina medio condicionado por oligodendrocitos u OCM.
Almacene el OCM a temperaturas más bajas hasta su uso posterior para evitar la degradación de proteínas y otras moléculas, preservando así la eficacia del OCM.
Coloque dos o tres placas de Petri de 100 milímetros prerrecubiertas con 10 mililitros de suspensión celular.
Incubar en una incubadora
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