Aislamiento de neuronas ganglionares vestibulares del oído interno de un ratón

Tome la mitad de la cabeza de un cachorro de ratón y extraiga el cerebro.

Corta la parte superior del cráneo y extirpa el tejido circundante para visualizar la cápsula ótica, una capa externa ósea que protege las estructuras del oído interno.

Transfiera el tejido a una placa de cultivo que contenga un medio tamponado.

Separar los ganglios vestibulares superior e inferior, que contienen los cuerpos de las células nerviosas vestibulares.

Afeite la cresta ósea y coseche el ganglio superior subyacente.

Transfiera el ganglio superior a una placa nueva que contenga el medio tamponado.

Retire los tejidos adherentes de la superficie para limpiar el ganglio aislado.

Coloque el ganglio en una solución que contenga enzimas proteolíticas.

Las enzimas degradan la matriz extracelular del tejido, aflojando las células.

Transfiera el ganglio a una placa con fondo de vidrio recubierta de polímero que contenga medio de cultivo y disocie mecánicamente el tejido para liberar las células.

Incubar, permitiendo que las células se adhieran y establezcan un cultivo de neuronas ganglionares vestibulares.

Saque el cerebro del ratón sacrificado con unas tijeras quirúrgicas cerradas. Cortar y extirpar el nervi