Una técnica para generar organoides cerebrales a partir de células madre embrionarias humanas

Tomemos colonias de células madre embrionarias humanas, o hESC, cultivadas en una matriz de soporte.

Aspirar el medio y añadir enzimas que degraden la matriz.

Lavar para eliminar las enzimas. Luego, agregue un medio y una pipeta para desalojar las colonias sueltas, dividiéndolas en grupos más pequeños.

Transfiera los racimos a un medio fresco e incube, permitiendo que los racimos formen agregados esféricos.

Deje que las esferas se asienten y elimine las células muertas.

Incubar con un medio que contenga factor de crecimiento de fibroblastos básico, o bFGF, para la proliferación celular.

Reponer con medios que contengan concentraciones de bFGF que disminuyan gradualmente para facilitar la diferenciación celular.

Introducir un medio de inducción neural, promoviendo la diferenciación de hESC en células madre neurales o NSC, transformando las esferas en organoides que exhiben una estructura neural similar a una roseta.

Agregue antibióticos para prevenir el crecimiento de microbios contaminantes durante el cultivo prolongado.

Las NSC se diferencian en neuronas y glía, desarrollando progresivamente los organoides en una estructura compleja que se asemeja a una corteza cerebral.

Diluya la