Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:52 min. • July 8th, 2025
Tome un segmento del intestino delgado de ratón previamente despojado del músculo longitudinal y el plexo mientérico, las capas que contienen neuronas entéricas y las células gliales.
Corta el tejido y colócalo en un tampón que contenga EDTA. Incubar con balanceo.
El EDTA interrumpe las uniones célula-célula, separando la mucosa epitelial de la lámina propia subyacente y las capas de tejido conectivo submucosas que contienen células gliales entéricas.
Pipetear repetidamente para desalojar las células epiteliales.
Filtre a través de un filtro de celdas y deseche el flujo.
Transfiera el tejido a un tampón de disociación no enzimática e incube con balanceo. El tampón de disociación afloja la lámina propia y la matriz extracelular submucosa, desprendiendo las células.
Pipetear repetidamente para disociar aún más las células.
Filtre a través de un filtro celular para recolectar las células.
Centrifugar y volver a suspender las células en un tampón.
Tome pocillos recubiertos de proteínas de adhesión que contengan un medio de crecimiento glial y coloque las células en placas.
El recubrimiento facilita la adhesión celular, mientras que los factores de crecimiento promueven selectivamente l
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