Un método para el aislamiento de unidades neurovasculares a partir de cerebro de rata

Comience con un mortero de vidrio frío que contenga tejido cerebral cortical de rata, que es la capa más externa del cerebro.

Agregue un tampón de microvasos cerebrales o BMB, que contenga inhibidores de la proteasa.

Ahora, mueva el mortero hacia arriba y hacia abajo para disociar el tejido.

Esta agitación libera las unidades neurovasculares, o NVU, que comprenden microvasos, pericitos, neuronas y células gliales. Los inhibidores de la proteasa bloquean las proteasas liberadas, protegiendo los microvasos.

Transfiera esta mezcla a un tubo.

Agregue una solución densa de polisacáridos. Use un vórtice para mezclar la solución con otros contenidos de manera uniforme.

centrífuga. Los polisacáridos densos permiten la sedimentación de NVU, que son más densos que los restos de tejido.

Deseche el sobrenadante y vuelva a suspender las NVU en BMB que contengan inhibidor de proteasa y solución de polisacáridos.

Usa el vórtice para mezclar el contenido.

Repita el proceso de centrifugación. Deseche el sobrenadante para eliminar cualquier residuo residual.

Vuelva a suspender las NVU en BMB y guárdelas para su posterior análisis.

Coloque el tejido cerebral cortical en un mortero de vidrio frío. Lue