Generación de neuronas piramidales corticales a partir de células madre neurales humanas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:08 min. • July 8th, 2025
En una placa de cultivo, cubra un cubreobjetos con poliornitina, un polímero cargado positivamente, e incube.
La poliornitina forma una capa similar a una malla que ayuda a que las células cargadas negativamente se adhieran al cubreobjetos.
Retire la solución y lave los cubreobjetos con una solución salina tamponada para eliminar la poliornitina no unida.
Agregue una solución que contenga una proteína de matriz extracelular llamada laminina e incube.
La laminina forma una matriz sobre el cubreobjetos recubierto de poliornitina, lo que mejora la unión celular.
Deseche la solución y tome una pequeña cantidad de células madre neurales suspendidas en un medio libre de factores de crecimiento.
Agregue este cultivo de baja densidad sobre el cubreobjetos preparado con un movimiento de rotación lenta para distribuir uniformemente las células.
Inicialmente, la privación del factor de crecimiento promueve la división celular.
Con el tiempo, las células madre se diferencian en neuronas con proyecciones largas
Eventualmente, las neuronas producen estructuras similares a la columna vertebral sobre sus proyecciones, como las neuronas piramidales corticales.
Para preparar cultivos neuronales, col
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