Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:34 min. • July 8th, 2025
Tome una sección de la columna vertebral de una rata y divídala para extirpar la médula espinal.
Separar los ganglios de la raíz dorsal, o DRG, un grupo de neuronas rodeadas de células gliales satélite o SGC.
Coloque los DRG en un medio de cultivo. Retire las raíces nerviosas para reducir la contaminación por SGC.
Tratar con colagenasa para degradar la matriz tisular y lavar para eliminar las enzimas.
Introducir tripsina para interrumpir las conexiones intercelulares. Añadir un sérum que contenga proteínas que desactiven la tripsina.
Agregue el medio de cultivo y disocie mecánicamente el tejido. Filtre la suspensión para aislar células individuales y centrifugar para eliminar los restos de tejido.
Vuelva a suspender las celdas para colocarlas en capas en un medio de gradiente de densidad y centrifuge.
Las neuronas con una mayor densidad se asientan en la parte inferior, facilitando la separación de las SGC.
Vuelva a suspender las neuronas en un medio de cultivo. Transfiéralos a un pocillo recubierto de sustrato de cultivo, lo que permite la unión celular.
Complementar con factores de crecimiento nervioso para la supervivencia neuronal.
Para obtener las neuronas DRG después de extra
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