Mejora de la diferenciación de células madre con un tratamiento transitorio de DMSO

Comience con una placa de pocillos múltiples que contenga células madre pluripotentes humanas adheridas con capacidad de diferenciación de múltiples linajes.

Introduzca un medio de células madre que contenga dimetilsulfóxido o DMSO.

El DMSO ingresa a las células y evita la progresión del ciclo celular desde la fase Gap 1 o G1, una etapa inicial del ciclo celular, hasta la síntesis o fase S.

Esto crea una población uniforme de células en la fase G1, mejorando su capacidad de diferenciación.

Reemplace el medio con un medio de diferenciación ectodérmica rico en nutrientes que contenga inhibidores de las vías de señalización BMP y TGF-β.

Estos inhibidores se unen a receptores ALK específicos en las células madre, bloqueando las vías de señalización BMP y TGF-β y evitando su diferenciación en precursores de endodermo y mesodermo.

Esto permite la diferenciación selectiva de células madre detenidas por G1 en precursores ectodérmicos que poseen capacidad de diferenciación neural.

Reemplace regularmente el medio con un medio nuevo para mantener los niveles de nutrientes y factores de diferenciación, asegurando la supervivencia celular.

Pretratar las células con DMSO como se describe para cu