Aislamiento de células progenitoras madre neurales de la región periventricular de la médula espinal de una rata adulta
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:30 min. • July 8th, 2025
Comience con el tejido periventricular de la médula espinal de una rata adulta, una región rica en células madre/progenitoras neurales.
Transfiera el tejido a una solución que contenga papaína y ADNasa.
La papaína, una enzima proteolítica, escinde la matriz extracelular del tejido, mientras que la ADNasa degrada el ADN contaminante liberado por las células dañadas.
Disociar mecánicamente el tejido para obtener una suspensión unicelular.
Transfiera la suspensión a un tubo y centríquela. Retire el sobrenadante. Vuelva a suspender las células en una solución que contenga proteína de albúmina y un inhibidor de la proteasa.
La albúmina y el inhibidor desactivan la papaína.
Coloque la suspensión celular sobre una solución que contenga albúmina y un inhibidor de la proteasa.
La diferencia de densidades entre las capas forma un gradiente de densidad discontinuo.
Centrifugar para asentar las células intactas, mientras que los fragmentos de membrana celular permanecen en la interfaz.
Deseche el sobrenadante. Vuelva a suspender las células en medios de crecimiento y colóquelas.
Los factores de crecimiento promueven selectivamente la proliferación de las células madre/progenitoras neurales y s
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