Aislamiento y cultivo de pericitos cerebrales de ratón
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:43 min. • July 8th, 2025
Agregue tampón al tejido cerebral del ratón y homogeneícelo para liberar células y microvasos.
A continuación, agregue la solución de BSA-dextrano al homogeneizado. Mezclar y centrifugar para separar los componentes. Deseche el sobrenadante.
Vuelva a suspender los microvasos en tampón y páselos a través de un filtro, eliminando los vasos más grandes.
Ahora, centrifuga el filtrado y elimina el sobrenadante. Vuelva a suspender los microvasos en el tampón que contiene ADNasas.
Agregue enzimas proteolíticas para liberar células endoteliales y pericitos.
Las ADNasas degradan el ADN.
Agregue tampón que contenga BSA para detener la actividad enzimática. Centrifugar y desechar el sobrenadante.
Vuelva a suspender las celdas en el medio y colóquelas en una placa multipocillo recubierta de matriz basal. Incubar, promoviendo la adhesión celular.
Cambie los medios regularmente.
Las células endoteliales forman una monocapa y apoyan el crecimiento de pericitos.
El paso celular posterior en medios de pericitos en una placa de pocillos múltiples recubierta de gelatina promueve el crecimiento de pericitos al tiempo que elimina las células endoteliales.
Comience colocando el cerebro de un ratón C57 n
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