Aislamiento de oligodendrocitos primarios murinos mediante perlas inmunomagnéticas

Tome una suspensión de células neurales, incluidos oligodendrocitos inmaduros y células neuronales primarias, de un cachorro de ratón.

Vuelva a suspender las células en un tampón magnético de clasificación de células para evitar la aglomeración de células.

Agregue microperlas magnéticas diseñadas que transportan anticuerpos anti-O4 en su superficie. Agite la solución para asegurar una mezcla uniforme.

Incubar para permitir que las microperlas se unan con galactolípidos sulfatados, un antígeno O4 en los oligodendrocitos, mientras que otras células permanecen unidas o sueltas.

Lave la mezcla con un tampón de clasificación de células adicional.

Centrifugar y desechar el sobrenadante, luego volver a suspender las células.

A continuación, pase las células unidas a perlas en una columna de separación magnética equipada con un filtro que elimina los grupos de células más grandes.

Durante la ejecución, bajo un campo magnético, los complejos unidos a las perlas se mueven hacia el imán, adhiriéndose a los lados.

Lave para eliminar las células sueltas y sueltas.

Recupere la columna del separador y lávela con un medio de proliferación para recolectar los oligodendrocitos primarios para futuras