Diferenciación de células madre embrionarias de ratón en una población de neuronas en red
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 6:04 min. • July 8th, 2025
Semillas de células madre embrionarias de ratón en un plato de baja adhesión que contiene medios de diferenciación.
Incubar bajo rotación para facilitar la agregación celular y la diferenciación en un linaje neuronal.
Transfiera los agregados a un tubo y déjelos asentarse por gravedad. Deseche el papel.
Vuelva a suspender y transfiera los agregados al plato original que contiene medios de diferenciación suplementados con ácido retinoico.
El ácido retinoico induce la expresión génica neuronal, desencadenando la diferenciación en células progenitoras neurales.
Transfiera los agregados a un tubo. Retire el medio y agregue tripsina para disociar los agregados.
Agregue un inhibidor para neutralizar la tripsina.
Pipetear repetidamente para obtener una suspensión celular homogénea. Filtrar la suspensión para eliminar los áridos.
Centrifugar y eliminar el sobrenadante. Vuelva a suspender las celdas en el medio.
Siembre las células en un plato recubierto de polímero para facilitar la adhesión celular.
Retire el medio. Agregue medios nuevos que contengan factores de crecimiento para promover la maduración neuronal y formar una población de neuronas en red.
La diferenciación de las ESC en neu
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