Generación de un corte coronal del cerebro que expone las regiones de la amígdala desde el cerebro de un ratón

Tome un cerebro de ratón en un tampón helado y retire su porción posterior que contiene el cerebelo y la porción anterior con la corteza prefrontal medial, o mPFC.

La parte media contiene regiones de la amígdala que procesan emociones como el miedo y la ansiedad.

Mueva la sección del cerebro sobre un papel de filtro para eliminar el exceso de tampón.

Pégalo en un escenario y fija un bloque de agar detrás de la sección para evitar que se mueva durante el corte.

Coloque esta etapa en una cámara de corte de vibrátomo con el tampón helado.

Corta la sección para obtener una fina rebanada de cerebro coronal.

Esto expone las regiones de la amígdala, que contienen conexiones sinápticas entre las neuronas de la amígdala y las proyecciones de las neuronas mPFC que regulan las respuestas de la amígdala.

Corta la rebanada en dos mitades, cada una con una región de la amígdala.

A continuación, transfiéralos a una cámara de interfaz que contenga líquido cefalorraquídeo artificial oxigenado.

Recuperar las rodajas a temperatura fisiológica para mantener la viabilidad neuronal.

Después de obtener el cerebro, use un bisturí para extirpar el cerebelo y la parte interior del cerebro, y luego enfríe la parte media del cerebro en una solución de corte helada como antes. Seca el cerebro con papel de filtro y luego pégalo a la etapa de vibratomo.

Nuevamente, fije un bloque de agar adicional detrás del cerebro para mayor estabilidad mientras corta. Después de colocar la platina en la cámara de corte llena de solución de corte a 4 grados Celsius, corte secciones coronales de 320 micras a través de la amígdala. Córtelos por la mitad y recoja las secciones en la cámara de interfaz como antes.