Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 5:00 min. • July 8th, 2025
Tome fragmentos de hipocampo de rata perfundidos.
Incubar con papaína para digerir la matriz extracelular del tejido y aflojar las células, incluidas las neuronas, los astrocitos y la microglía.
Agregue DNasa y mezcle.
Disociar mecánicamente el tejido mediante pipetas de diámetros progresivamente decrecientes para obtener una suspensión unicelular. Incubar para que la DNasa degrade el ADN contaminante.
Pase la suspensión a través de un colador, eliminando los escombros.
Agregue tampón que contenga iones divalentes para detener la actividad enzimática.
Centrifugar y eliminar el sobrenadante rico en enzimas.
Ahora, agregue perlas magnéticas tampón y antimielina. Incube para que las perlas se unan a los restos de mielina.
Después de la incubación, centrifugar y eliminar el sobrenadante.
Vuelva a suspender la mezcla en tampón y cárguela en una columna de separación magnética que contenga esferas ferromagnéticas colocadas en el campo magnético del clasificador magnético.
El campo magnético retiene los restos de mielina unidos a perlas magnéticas en la columna mientras pasan las células libres de mielina.
Lave la columna con tampón y recoja el flujo continuo que contiene neuronas, astroc
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos