Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:10 min. • July 8th, 2025
Tomar una suspensión de células obtenidas de gusanos transgénicos Caenorhabditis elegans en un medio de cultivo.
La suspensión contiene células de varios tejidos, incluidas las neuronas del sistema nervioso.
Los gusanos transgénicos fueron diseñados para expresar una proteína fluorescente conjugada a un transportador transmembrana vesicular. Este transportador, presente en las vesículas sinápticas que transportan el neurotransmisor acetilcolina, se encuentra en las neuronas colinérgicas de todo el cuerpo.
Centrifugar la suspensión celular y desechar el sobrenadante. Vuelva a suspender las células en un medio de cultivo nuevo para la clasificación de células activadas por fluorescencia, o FACS.
Analice la suspensión de celdas mediante FACS. Las neuronas colinérgicas marcadas con fluorescencia emiten fluorescencia al exponerse a la luz de una longitud de onda adecuada, separándolas de otras células no marcadas.
Transfiera las neuronas aisladas a una placa de pocillos múltiples. Incube las células en una cámara humidificada para mantener el nivel de humedad.
Centrifugar las células de la suspensión celular aislada a 10.000 veces g y a 4 grados centígrados durante 5 minutos. Deseche el
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos