Aislamiento y cultivo de células de telencéfalos dorsolaterales de embriones de ratón

Tome un embrión de ratón en un tampón y separe el cráneo para aislar el cerebro.

Retire las meninges, la capa membranosa que cubre el cerebro.

Diseccionar el cerebro para separar los hemisferios.

Aísle los telencéfalos dorsolaterales de los hemisferios y transfiéralos a un tubo.

Los telencéfalos dorsolaterales son ricos en neuronas y células progenitoras neurales.

Centrifugar y eliminar el sobrenadante.

Agrega una solución enzimática. Las enzimas descomponen la matriz del tejido, aflojando las células.

Introducir un medio de proliferación que contenga suero. Las proteínas séricas inhiben la actividad enzimática.

Use una pipeta para disociar mecánicamente el tejido, formando una suspensión celular.

Centrifugar y eliminar el sobrenadante que contiene enzimas inactivadas y restos de tejido.

Resuspender las células en el medio de proliferación.

Transfiera las células a una microplaca recubierta de sustrato de cultivo celular.

Incubar para que las células se adhieran al sustrato. El medio facilita la proliferación de células progenitoras.

Comience extrayendo los cerebros de 5 a 10 embriones E14 en una placa de Petri con medio de disección frío. Use fórceps para extraer con cuidado la pi