Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 3:37 min. • July 8th, 2025
Tome un ganglio de la raíz dorsal o DRG, un grupo de neuronas sensoriales, en un medio frío que contenga suero para proteger las neuronas durante el procesamiento posterior.
Centrifugar, luego retirar el sobrenadante.
Agregue un tampón de fosfato que contenga enzimas digestivas e incube con agitación suave.
Las enzimas disocian la matriz extracelular, o ECM, y el tejido DRG, aflojando las células.
Agregue un medio que contenga suero para inactivar las enzimas.
Centrifuga, luego desecha el sobrenadante.
Vuelva a suspender el DRG y disocie mecánicamente el tejido utilizando pipetas de tamaños progresivamente más pequeños para obtener una suspensión celular.
Coloque las células en capas sobre un gradiente de densidad de albúmina sérica bovina.
centrífuga. Las neuronas se asientan en el fondo, formando un gránulo.
Deseche las capas que contienen restos de tejido.
Vuelva a suspender las neuronas en un medio de cultivo.
Agregue las neuronas a una placa de cultivo recubierta de ECM e incube.
Retire el medio y agregue células asesinas naturales o NK.
Agregue un medio para co-cultivar y estudiar la interacción entre estas células.
Coseche los DRG en un tubo cónico de 15 mililitros lleno de
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