Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:52 min. • July 8th, 2025
Comience con una célula progenitora neural que contenga bien o agregados de NPC en medios diferenciadores-1 o DM-1.
Estas NPC son precursoras del linaje neural generado a partir de células madre pluripotentes inducidas por humanos o hiPSC que utilizan DM-1 en condiciones controladas.
Transfiera los agregados NPC a un inserto de membrana colocado dentro de un pocillo que contenga DM-1 y elimine el exceso de medio.
Cambie el medio a DM-2 e incube.
La DM-2 proporciona nutrientes y factores de diferenciación que promueven la maduración de las NPC en diferentes tipos de células neuronales.
Los NPC indiferenciados se transforman en cuerpos embrioides, conocidos como cuerpos embrioides libres de suero o SFEB, ya que el medio carece de suero. Estos EB se asemejan a la morfología de un cerebro en desarrollo.
Transfiera el inserto a un pocillo que contenga DM-3.
La DM-3 contiene factores de crecimiento esenciales para el mantenimiento y crecimiento de los SFEB.
Incube hasta que los SFEB alcancen el tamaño deseado.
Después de dos semanas de cultivo de las células, prepare placas de seis pocillos con insertos de cultivo celular de 40 micras y 1 mililitro de medio DM1. Incube estas placas duran
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