JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociencia
0 vistas • 2:05 min • July 8th, 2025
Comience con un cocultivo de neuronas y astrocitos en una matriz de microelectrodos de múltiples pocillos o MEA.
Cada pocillo contiene una red de neuronas derivadas de células madre pluripotentes inducidas por humanos, o hiPSC. Los astrocitos de rata brindan apoyo para mantener la red.
La base de los pocillos contiene una rejilla de pequeños electrodos.
Coloque el MEA en un dispositivo de registro para capturar la actividad electrofisiológica espontánea de la red neuronal.
Fluya una mezcla de gas humidificado en el cultivo para evitar la evaporación del medio y estabilizar el pH, asegurando la viabilidad celular.
Las neuronas transmiten señales a través de impulsos eléctricos, conocidos como potenciales de acción, que viajan a lo largo de sus axones.
Al llegar a la sinapsis, el impulso desencadena la liberación de neurotransmisores, que propagan la señal a la siguiente neurona.
Los electrodos dentro de cada pocillo registran simultáneamente los potenciales de acción generados por múltiples neuronas conectadas sinápticamente.
La actividad electrofisiológica espontánea de la red neuronal confirma la diferenciación de las hiPSC en neuronas.
Adquiera los datos a 1.200 veces la amplificación y muestree la señal a 10 kilohercios utilizando la tarjeta de adquisición de datos MCS. Registre 20 minutos de actividad electrofisiológica de neuronas derivadas de hiPSC cultivadas en MEA. Durante el registro, mantenga la temperatura a 37 grados centígrados y evite la evaporación del medio y los cambios de pH mediante la entrega de un flujo lento y constante de gas humidificado a los MEA. Después de eso, analice los datos utilizando un paquete de software personalizado.