Estimulación transespinal de corriente directa de la motoneurona espinal de una rata

Comience colocando una esponja empapada en solución salina en la vértebra torácica-12 de una rata preparada para el procedimiento.

Coloque un electrodo sobre él para la estimulación transespinal de corriente continua o tsDCS, que implica aplicar una corriente continua a través de la médula espinal.

Para medir el registro intracelular de una motoneurona diana durante tsDCS, inserte un microelectrodo en la médula espinal en el lugar de su origen.

Evalúe el potencial de membrana de referencia de la motoneurona y la frecuencia de los impulsos eléctricos para asegurarse de que el microelectrodo esté colocado de forma segura para mediciones precisas durante tsDCS.

Aplique tsDCS anódicos, donde los iones cargados positivamente ingresan a la neurona a medida que la corriente fluye desde el ánodo a través del tejido hasta el cátodo.

Aplique tsDCS catódicos, donde los iones cargados negativamente ingresan a la neurona a medida que la corriente fluye en la dirección inversa.

Registre los cambios en las propiedades eléctricas de la motoneurona durante la tsDCS anódica y catódica.

Para colocar los electrodos de estimulación de corriente continua transespinal, coloque una esponja empapada en solución salina en el lado dorsal de la vértebra TH-12 y use una manipulación fina para presionar la esponja con un electrodo de estimulación de corriente continua transespinal activo. Luego, monte un microelectrodo personalizado en el micromanipulador, lo que permite un movimiento de paso de 1 a 2 micras y calibración estereotáxica, e introduzca una punta de micropipeta en un parche seleccionado en el PR en un ángulo medial-lateral de 15 a 20 grados.

Para registrar la membrana de la neurona motora y las propiedades de disparo, en el modo puente del amplificador intracelular, estimule las respectivas ramas nerviosas para identificar la neurona motora sobre la base de la apariencia de todo o nada del potencial de acción antidrómico.

En el modo de pinza de corriente discontinua del amplificador intracelular con un modo de velocidad de conmutación de corriente de 4 a 8 kilohercios, use pulsos de corriente despolarizantes intracelulares de 0,5 milisegundos para evocar un potencial de acción ortodrómica en una neurona motora.

Para calcular la resistencia de entrada de la célula, estimule una neurona motora con 40 pulsos cortos de 100 milisegundos de corriente hiperpolarizante de 1 nanoamperio. Para determinar el valor de la reobase como la amplitud mínima de la corriente despolarizante requerida para provocar un solo pico, estimule una neurona motora con pulsos de onda cuadrada de 50 milisegundos a amplitudes crecientes.

Luego, inyecte pulsos de onda cuadrada de 500 milisegundos de corriente despolarizante a amplitudes crecientes en pasos de 0.122 nanoamperios para evocar descargas rítmicas de neuronas motoras. Para la estimulación transespinal de corriente continua, inicie los procedimientos de polarización mediante la aplicación transespinal de corriente continua, mientras mantiene una penetración estable de la neurona motora.