Establecimiento de una pinza de parche de celda completa para el registro electrofisiológico de una retina de ratón de montaje plano

Coloque una retina de ratón de montaje plano en una solución fisiológica dentro de una cámara de grabación.

Con un microscopio, coloque una pipeta de registro sobre la retina. La pipeta contiene un electrodo y se llena con una solución interna.

Aplique presión positiva para evitar la obstrucción de la pipeta, insértela en la retina y luego reduzca la presión para evitar daños en los tejidos.

Avance la pipeta hacia las células amacrinas de estallido estelar, o SAC, que están unidas sinápticamente a otras neuronas.

Acérquese a una célula hasta que se forme un hoyuelo en su membrana. Libere la presión, permitiendo que la membrana se adhiera a la punta.

Utilice una corriente negativa para introducir un parche de membrana en la pipeta.

Aplicar succión para romper la membrana, estableciendo continuidad entre el electrodo y el citoplasma celular, una técnica llamada patch-clamp de células completas.

Para registrar corrientes sinápticas, aplique un voltaje para mantener constante el potencial de membrana del SAC.

Los neurotransmisores liberados por las neuronas unidas sinápticamente desencadenan el flujo de iones a través de los receptores sinápticos SAC, medidos por el electrodo.

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