Excitación externa de cultivos neuronales con patrones unidimensionales
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:29 min. • July 8th, 2025
Tome un cubreobjetos que contenga un cultivo neuronal con patrón 1D.
Las neuronas están cargadas con un tinte indicador de calcio, que emite fluorescencia al unirse el calcio.
Transfiera el cubreobjetos a una cámara de imágenes de microscopio de fluorescencia que contenga una solución de registro extracelular.
Ensamble un soporte con dos electrodos de alambre paralelos separados por una distancia.
Invierta el soporte y colóquelo sobre el cultivo neuronal con los electrodos sumergidos en la solución de grabación.
Conecte los electrodos a un amplificador. Aplique una onda cuadrada bipolar pulsada sin CC para generar un campo eléctrico unidireccional uniforme a través de las neuronas sin causar lesiones.
El campo eléctrico generado excita las neuronas, desencadenando un potencial de acción.
El potencial de acción viaja a lo largo del axón, activando los canales de calcio dependientes de voltaje y provocando la entrada de calcio en la terminal neuronal. Además, los neurotransmisores se liberan en la sinapsis, lo que facilita la transmisión sináptica.
Después de la afluencia de iones de calcio, estos iones se unen al tinte intracelular y emiten fluorescencia, lo que indica actividad neu
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