Preparación de un modelo de rata para evaluar la integridad de la vía visual mediante una configuración de electrofisiología

La luz estimula los fotorreceptores del ojo, enviando señales eléctricas a la corteza visual del cerebro para procesar la información visual.

Para medir la integridad de esta vía visual, comience con una rata anestesiada y adaptada a la oscuridad en una habitación oscura.

Coloque un electrodo VEP de referencia alrededor de los dientes frontales inferiores de la rata.

Asegure la rata con una tira de sujeción en una plataforma ERG frente a un cuenco Ganzfeld, un dispositivo de iluminación de luz dentro de una jaula de Faraday.

Coloque los electrodos ERG de referencia alrededor del ecuador del ojo, rodeando el anillo escleral, y asegúrelos.

Luego, conecte los electrodos activos VEP a los tornillos craneales preimplantados para detectar señales corticales.

Coloque los electrodos ERG con lubricante en el centro de los ojos para medir sus respuestas a los estímulos de luz.

Retire el exceso de lubricante e inserte un electrodo de tierra en la cola para reducir el ruido eléctrico.

Acerque la plataforma ERG al recipiente Ganzfeld y cierre la jaula de Faraday para minimizar las interferencias externas.

Para las grabaciones escotópicas, todos los procedimientos se realizan en una habitación oscura. A modo de ilustración, el posicionamiento de los electrodos se realiza bajo la iluminación normal de la habitación. El animal se adaptó a la oscuridad durante 12 horas y se anestesia con ketamina y xilacina.

Después de la dilatación de la pupila y la anestesia tópica, enganche el electrodo EP inactivo alrededor de los incisivos inferiores. Luego, coloque al animal en la plataforma ERG frente al cuenco de ganzfeld situado en la jaula de Faraday. Asegure al animal a la plataforma con una tira de cierre de velcro, colocada firmemente pero no firmemente alrededor de la nuca.

A continuación, coloque los electrodos inactivos de ERG rodeando el anillo escleral de forma no invasiva alrededor del ecuador del ojo, aproximadamente tres milímetros detrás del limbo. Estabilice esto uniendo los electrodos a la tira de cierre de velcro alrededor de la nuca. Repita el procedimiento para el ojo contralateral.

Ahora, sujete los electrodos activos VEP colocando pinzas de cocodrilo en los tornillos de acero inoxidable preimplantados en el cráneo. Antes de la colocación del electrodo activo en ERG, coloque una pequeña gota de carboximetilcelulosa sódica al 1% en el electrodo para mejorar la calidad de la señal. Coloque los electrodos activos de ERG para tocar ligeramente la superficie corneal central utilizando un micromanipulador conectado al brazo estereotáxico personalizado.

Asegúrese de que la carboximetilcelulosa sódica solo entre en contacto con la córnea y no con la esclerótica, limpiando el exceso de líquido. Luego, inserte de 2 a 5 milímetros del electrodo de aguja rectificada de acero inoxidable por vía subcutánea en la cola. Deslice la plataforma más cerca del cuenco ganzfeld y asegúrese de que los ojos del animal estén alineados con la abertura del cuenco para permitir una iluminación uniforme de ambas retinas.

Posteriormente, cierre la jaula de Faraday para reducir el ruido extraño.